新型冠状病毒核酸检测实验室的生物安全及操作流程建议

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2019新型冠状病毒感染的肺炎疫情蔓延严重,该病作为急性呼吸道传染病已纳入《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病甲类传染病管理。新型冠状病毒经呼吸道飞沫接触传播和气溶胶传播,消化道等传播途径尚待明确


《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》推荐使用核酸检测方法用于新型冠状病毒的常规检测。随着疫情的不断加重,核酸检测需求大幅增加,实验室操作人员对该病毒的生物安全防护也越来越重视,以避免在进行高危测试过程中感染。下面汇总了相关指南、权威实验室和专家对该病毒进行核酸检测时所需注意的事项,尤其建议把样本处理及核酸提取的整个步骤都在生物安全柜内进行,推荐把核酸自动提取仪放入生物安全柜内使用




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依据《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》,进行新型冠状病毒核酸检测,实验室需符合以下生物安全要求



  • 暂按照病原微生物危害程度分类中第二类病原微生物进行管理

  • 建议56度30分钟灭活后,再进行核酸检测

  • 应在生物安全二级及以上实验室开展

  • B2生物安全柜中进行操作

  • 个人采用三级生物安全防护


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核酸检测的生物安全和检测质量,对实验室、设备、人员和试剂有较高的要求



  • 需要专门的PCR实验室分区,才能保证检测结果的准确性。

  • 推荐把核酸自动提取仪放入生物安全柜中进行样本提取,简便高效,保护操作者安全。

  • 不同厂家试剂需要考虑与设备的匹配性,需厂家对相关仪器和试剂使用提供及时的培训和技术支持。

  • 不同试剂盒的性能和阳性检出率存在差别,对单靶标阳性或可疑结果建议采用不同试剂盒进行复核,或送CDC确证。

  • 从公开信息来看,目前批准的试剂多数不含UNG酶和dUTP防污染系统,可能存在假阳性风险


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关于样本处理及核酸提取的建议



  • 打开样本采样管盖、或可能产生气溶胶、可能接触样本的操作,必须在生物安全柜中进行。

  • 进行样本处理,要轻柔缓慢,尽可能缩短样本管打开的持续时间,减少样本转移步骤。

  • 有条件的单位,建议采用体积小巧的半自动核酸提取仪,放入生物安全柜中,在安全柜中完成样本加样和核酸提取


图片来源于北京协和医院培训视频截图


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实验室分区、自动化检测的重要性



  • 防止污染:实验室分区可减少交叉污染风险,自动化检测减少操作人员被感染风险

  • 快速高效:采用快速自动化提取仪,2小时内可完成96个样本的全部检测

  • 节省人力:整个过程手工操作不超过30分钟

  • 结果准确:自动化操作,避免人为误差,大幅提高检测的准确性

  • 通量灵活:适用于1-96样本处理检测,可灵活、快速处理患者样本


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推荐使用的自动核酸提取仪及新型冠状病毒核酸检测试剂



GP快速自动核酸提取仪

  • 快速,15分钟内可完成48个样本的提取

  • 体积小巧,可放入生物安全柜中使用

  • 与经典Qiagen柱法相比,提取效果更好或相近

  • 试剂种类齐全,有超过15种提取试剂可用

  • 应用广泛,适用于各种常见的标本类型



圆点自动核酸提取仪

  • 35分钟处理32样本

  • 体积小巧可放入生物安全柜中使用

  • 提取灵敏度高,重复性好,结果稳定

  • 彩色全触控屏幕操作,简单易懂

  • 具有可调节的加热功能和可定时开关紫外杀菌功能






新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
  • 全自动提取:搭配快速核酸提取仪及提取试剂,快速、安全提纯核酸

  • 3靶标检测:定性检测新型冠状病毒ORF1ab基因和N基因、E基因,灵敏度500 copies/mL

  • 全程内参监控:有效监控提取、逆转录和扩增等整个检测过程,避免假阴性结果

  • 防污染体系:采用UNG酶和dUTP有效防止扩增产物污染,避免假阳性结果


“持续创新,共享健康”是每个复星人的追求,希望以上产品和建议可帮助实验室安全、快速、省力地进行新型冠状病毒的应急检测,早日赢得疫情防控的的最终胜利!


参考资料

[1] 《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》

[2] 《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南(第四版)》

[3] 《新型冠状病毒感染的肺炎防控方案(第四版)》

[4] 《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》

[5] 新型冠状病毒流行地区临床实验室常见问题解答(第一版),华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科,检验医学网

[6] 新型冠状病毒核酸检测标准操作流程的培训视频来了!北京协和医院,协和医生说

[7] 新型冠状病毒(2019-nCoV)对医院检验科实验室的要求及防控建议,曹国庆,洁净室网与咖

[8] WHAT?4名检验科医生从未接触病人,却被感染新冠病毒???体外诊断网

[9] 检测4次才确诊?!试剂盒产能上去了,为什么确诊还是那么难?21世纪经济报道

[10] 试剂盒问题:为什么一盒难求?为什么“病愈”患者会阴转阳?医学界